产品货号：
KD1282
中文名称：
非变性酵母蛋白提取试剂盒
英文名称：
Yeast Total Protein Extraction Kit
产品规格：
50T
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本制品通过使用玻璃珠震荡法破壁结合化学法破碎酵母细胞壁，适用于多种酵母菌的培养物(包括菌液或平板菌落)。提取液不含蛋白变性剂，提取过程无需高温处理，提取的总蛋白可用于蛋白活性检测相关实验。该试剂盒提取的蛋白可以用Bradford蛋白浓度测定试剂盒(货号：KD3027)或BCA蛋白浓度测定试剂盒(货号：KD3028)进行蛋白定量。
| 组分 | 规格 |
| 非变性洗涤液 | 50mL |
| 非变性提取液 | 10mL |
| 玻璃珠 | 5g |
保存：室温，有效期2年。
准备工作：
将洗涤液和提取液置于冰上预冷。
- 5,000rmp，4℃离心5min，收集酵母菌液(1～5mL)细胞沉淀(酵母菌液OD值0.5-2.0)。
- 加入1mL预冷的洗涤液，震荡混匀。5,000rmp，4℃离心5min沉淀酵母细胞，弃上清。
- 用100μL预冷提取液悬浮酵母细胞，并快速转移到1.5mL塑料离心管中。
- 加入0.05g的玻璃珠，在旋涡震荡器上剧烈震荡混合5～10min(间歇冰浴冷却)。
- 用移液器或者巴斯德吸管回收提取液。
- 再加入100μL预冷提取液到剩余的玻璃珠中，稍加震荡，再次回收提取液。
- 合并两次所得提取液即为酵母总蛋白样品。
- (可选步骤)12,000rmp，4℃离心15min，上清含可溶性蛋白质，沉淀含不溶性蛋白质。
- 提取总蛋白样品直接用于后续活性检测实验或-80℃保存备用。
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